人心磷脂合成酶(CRLS1)快速檢測ELISA試劑盒使用方法

檢測人心磷脂合成酶（CRLS1）的ELISA試劑盒操作其實(shí)很規(guī)范，核心是?抗體夾心法?，通過顯色反應(yīng)定量檢測。以下是關(guān)鍵步驟和要點(diǎn)：

一、檢測原理

試劑盒采用?抗體夾心法?：抗人CRLS1抗體包被酶標(biāo)板，標(biāo)本中的CRLS1與抗體結(jié)合后，加入生物素化抗體和ABC復(fù)合物形成免疫復(fù)合物，最后通過TMB顯色底物顯色，450nm處測OD值，濃度與OD值呈正比。

二、操作步驟

?樣本處理?：組織樣本需均質(zhì)后取1.0g±0.05g，加酶標(biāo)二抗孵育。

?加樣與孵育?：標(biāo)準(zhǔn)品和樣本加樣后，加入酶連接物和抗體溶液，室溫孵育1小時。

?洗板與顯色?：倒出液體后洗板，加入TMB顯色液，避光反應(yīng)15分鐘。

?讀數(shù)?：加終止液后，450nm處讀OD值。

三、結(jié)果計算

?OD值處理?：建議減除空白孔值（若空白孔OD低于0.1可直接計算）。

?標(biāo)準(zhǔn)曲線?：以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線，根據(jù)樣品OD值計算含量。

四、試劑盒選擇

?信裕生物?：檢測范圍0.78-50ng/ml。

?澳睿賽生物?：采用雙抗體夾心模式，結(jié)果判斷需減空白孔值。

五、注意事項(xiàng)

洗板時避免微孔干燥。

樣本和標(biāo)準(zhǔn)品需做雙孔平行實(shí)驗(yàn)。

顯色后5分鐘內(nèi)讀數(shù)。