AQP-4豬水通道蛋白4酶聯(lián)免疫試劑盒常見問題解決方案

    該試劑盒用于科研實(shí)驗(yàn)，不用于臨床診斷，適用于豬源性樣本中水通道蛋白4（AQP-4）的定量檢測(cè)。其檢測(cè)原理為雙抗體一步夾心法：利用包被了捕獲抗體的微孔板，結(jié)合樣本中的AQP-4抗原，再與HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體反應(yīng)，最終通過TMB底物顯色，在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定OD值，計(jì)算濃度

一、試劑盒選擇與驗(yàn)證

?種屬特異性?：豬AQP-4試劑盒需確認(rèn)種屬特異性，建議聯(lián)系供應(yīng)商獲取豬源試劑盒或驗(yàn)證人源試劑盒的交叉反應(yīng)性。

?替代方案?：若無豬源試劑盒，可參考人AQP-4 ELISA試劑盒操作流程，但需驗(yàn)證其在豬樣本中的適用性。

二、操作流程優(yōu)化

?試劑準(zhǔn)備?：所有試劑需在室溫（20-25℃）平衡15-30分鐘；濃縮洗液按1:10比例用純水稀釋。

?加樣與孵育?：每孔加50μL標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品或血清，建議先加陰性質(zhì)控品，再按濃度由低到高加標(biāo)準(zhǔn)品；加生物素后振蕩孵育2小時(shí)。

?顯色與讀數(shù)?：加底物TMB顯色，酸終止后呈黃色；酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)測(cè)OD值，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算濃度。

三、樣本處理與保存

?樣品處理?：血清需澄清，渾濁或溶血需離心（13,000 RPM，5分鐘）。

?試劑保存?：未用完的生物素和SA-POD可冷藏（2-8℃）保存3天。

四、結(jié)果分析與驗(yàn)證

?標(biāo)準(zhǔn)曲線?：每次實(shí)驗(yàn)需建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，確保結(jié)果準(zhǔn)確性。

?交叉反應(yīng)性驗(yàn)證?：若使用人源試劑盒，需驗(yàn)證其在豬樣本中的交叉反應(yīng)性。